化妆品代加工 - 化妆品中的氢醌、苯酚检测方法  

  建立二极管阵列检测器高效液相色谱法测定 化妆品 中氢醌、苯酚的确认方法。方法 : 用甲醇溶解、超声波提取样品后 . 用紫外吸收谱图和保留时间定性测定。结果 : 回收率为 : 氢醌 107%; 苯酚 114% 检出限 : 氢醌 1217 μ g/g; 苯酚 1115 μ g/g 结论 : 方法分离效果好、简便快速、灵敏度高、定性准确 , 适合于各类化妆品中氢醌、苯酚测定。

[ 关键词 ] 高效液相色谱 ; 二极管阵列检测器 ; 化妆品 ; 氢醌 ; 苯酚

同时具有一定的美白作用。但由于其毒性及刺激性大 ,    氢醌、苯酚作为消毒防腐药用于治疗皮肤癣、湿疹及止痒 . 临时接触能引起白血病、肿瘤、心血管疾病。所以我国化妆品卫生规范规定氢醌、苯酚为美白祛斑类化妆品的禁用物质。只可作为药物治疗用于局部和短期使用。目前 , 氢醌、苯酚的检测方法有分光光度法、气相色谱法、液相色谱法 [ 1 3 ] 气质联用法。本文建立了二极管阵列检测器的高效液相色谱法 , 结果标明 , 该法分析速度快、干扰少、灵敏度高、定性定量准确 , 应用于各类美白、祛斑化妆品中氢醌、苯酚的监测 , 获得满意结果。

1 资料与方法

1.1 仪器

色谱工作站 ,    HP - 1100 高效液相色谱仪具二极管阵列检测器 . 自动进样器。

1.2 试剂

用少量甲醇溶解后转移至 100 ml 容量瓶中 ,    氢醌标准溶液 : 准确称取 011001 g 氢醌 ( 色谱纯 ) 于烧杯中 . 再用甲醇定容至刻度。该溶液浓度为 1100 mg/ml, 可稳定 1 个月。苯酚标准溶液 : 准确称取 011002 g 苯酚 ( 分析纯重结晶 ) 于烧杯中 , 用少量甲醇溶解后转移至 100 ml 容量瓶中 , 用甲醇定容至刻度。该溶液浓度为 1100 mg/ml, 可稳定 1 个月。盐酸乙二胺 : 称取 01548 g 盐酸乙二胺 ( 分析纯 ) 溶于少量精制去离子水中 , 加水至 1 000 ml 用 0145 μ 微孔滤膜过滤。浓度为 5 mmol 流动相 : 甲醇 ( 色谱纯 ) 与 5 mmol 盐酸乙二胺混合液 ( 40 + 60

1.3 色谱条件

流动相 : 甲醇 + 盐酸乙二胺 ( 50 mmol = 40 + 60,    色谱柱 : ZORBAX1CN 416 mm 25 cm. 柱温 : 30 ℃ ; 流速 : 0180 ml/min, 检测波长 : 277 nm, 波长宽度 16 nm; 参比波长 : 360 nm, 波长宽度 : 50 nm

1.4 样品测定

置于 10 ml 比色管中 ,    称取试样 1100 g. 用甲醇定容至刻度 , 充分振荡 , 于超声波清洗器中超声 15 min, 离心 , 用 012 μ微孔滤膜过滤。取 5 μ l 注入色谱仪 , 测其峰高。同时做试剂空白。

1.5 规范曲线的制备

用甲醇定容至刻度。此溶液浓度分别为 25 50 100 μ g/ml 进样量为 5 μ l,    用移液管分别准确移取 01500 mg/ml 氢醌、苯酚标准溶液 0150 1100 2100 ml 于 10 ml 棕色容量瓶中 . 注入色谱仪以浓度为横坐标 , 峰面积为纵坐标 , 绘制规范曲线结果见图 1 图 2

1.6 计算公式 ω = ρ × V/m

式中 :

μ g/ ω — 样品中氢醌或苯酚的质量分数 .g

μ g/m ρ — 从校准曲线上查出的待测液中氢醌、苯酚的质量浓度 .l

mV 样品液中总体积 .l

m 样品质量 .g

2 结果与讨论

2.1 色谱柱及流动相的选择

ZORBAX1CN 柱、流动相为甲醇 + 盐酸乙二胺 ( 50 mmol = 40 + 60 条件下分离效果好、灵敏度高。     本实验选择了 ODS - C18 ZORBAX1CN 色谱柱及甲醇、甲醇 : 盐酸乙二胺流动相。实验结果标明用 ODS 柱、甲醇为流动相氢醌、苯酚无响应 .

2.2 检测波长的选择

由氢醌、苯酚的紫外吸收谱图图 3 图 4 可见 ,    本实验对吸收波长 254 218 277 nm 进行选择 . 254 nm 处吸收值低 , 灵敏度差。

氢醌、苯酚在 218 nm 处有一最大吸收峰 ,    由图 3 图 4 所示 . 此波长下测定氢醌、苯酚具有较高的灵敏度。实验过程中发现 , 此条件下样品中许多组分都有吸收。具体结果见图 5, 样品在 218 254 277 nm 波长下检测色谱图。氢醌、苯酚在 277 nm 波长比 254 nm 具有较强的灵敏度 , 结果见图 6 氢醌、苯酚在 254 nm 与 277 nm 波长下吸光度值比较。所以本方法选用 277 nm 为测定波长。此条件下氢醌、苯酚有较好的分离效果 , 干扰少 , 灵敏度高 , 分析速度快。结果见图 7 氢醌、苯酚标准色谱图。

2.3 氢醌、苯酚准确定性的选择

但是由于化妆品样品种类繁多 ,    高效液相色谱用于定性的依据是样品与标准的保管时间相同 . 基体复杂 , 单纯用保管时间定性可靠性较差。本实验选用二极管阵列检测器高效液相色谱法 , 用保管时间和紫外吸收谱图共同定性 , 提高了方法的准确度。结果见图 8 图 9 样品的色谱图 , 图 10 图 11 样品的紫外吸收谱图与标准紫外吸收谱图的比拟。

样品色谱图中有一与标准物质保留时间相同的成份 ,    由图 8 图 9 图 10 图 11 可知 . 但两者紫外吸收谱图则完全不同 , 说明是两种不同的物质 , 则被测样品中不含氢醌、苯酚。所以本文选用二极管阵列检测器 , 定性结果更准确可靠。

2.4 方法的准确度和精密度

其中 3 份做样品本底测定 ,    精确称取面膜粉 1100 g 10 份于具塞试管中 . 其余每份样品中加 015 mg/ml 氢醌、苯酚标准溶液 1100 ml, 用甲醇定容至 10 ml 以下同样品处理操作 , 进行精密度和准确度测定。由实验得 , 方法的相对规范偏差为 : 氢醌 1150%; 苯酚 210% 回收率为 : 氢醌 107%; 苯酚 114% 氢醌最低检出量为 1127 μ g 当取样量为 1 g 时 , 最低检出浓度为 1217 μ g/g 苯酚最低检出量为 1115 μ g, 当取样量为 1 g 时 , 最低检出浓度为 1115 μ g/g 说明方法灵敏度、精密度、准确度均满足实验室测定的要求。

3 小结

    采用二极管阵列检测器高效液相色谱法测定化妆品中氢醌、苯酚分离效果好、分析速度快、灵敏度高、定性准确可靠。适用于各类美白、祛斑化妆品中氢醌、苯酚的测定。